分享一下钼钒酸显色液的配置方法

　　钼钒酸显色液有两类：根据被检物的化学组成是否遭受破坏，分为破坏性显色液和非破坏性显色液。
 

　　在实验中我们一般将它调配成A，B两种液体，当需要显色时就分别加入A，B液，当混合液与实验中复合物(抗原抗体复合物)反应就会产生显色效果。
 

　　A液一般由：PBS缓冲液，柠檬酸，ED-TA乙二氨四乙酸，ProcLin-300，过氧化氢(过氧化氢挥发性太高，容易丢失，我们现在正用过氧化脲来代替，效果还不错)组成。
 

　　B液一般由：PBS缓冲液，柠檬酸，ED-TA乙二氨四乙酸，ProcLin-300，硫代硫酸钠等。
 

　　由于钼钒酸显色液的反应一旦开始就一直持续反应，所以，当达到理想效果时一定要终止反映，就需要加入终止液了。
 

　　钼钒酸显色液的配置方法：
 

　　试剂：
 

　　1)盐酸(1+1水溶液)硝酸高氯酸
 

　　2)钒钼酸铵显色剂：称取偏钒酸铵1.25g，加硝酸250ml，另称取钼酸铵25g，加水400ml加热溶解，在冷却的条件下，将两种溶液混合，用水定容成1000ml。避光保存，若生成沉淀，则不能继续使用。
 

　　3)磷标准液：将磷酸二氢钾在105oC干燥1h，在干燥器中冷却后称取0.2195g溶解于水，定量转入1000ml容量瓶中，加入硝酸3ml，用水稀释至刻度，摇匀，即为50mg/ml的磷标准液。
 

　　试样的分解
 

　　干法：与Ca测定试样的制备方法一致，在实际中，Ca，P使用同一分解液。
 

　　标准曲线的制备：
 

　　准确移取磷酸标准液，取0、1.0、2.0、5.0、10.0、15.0ml于50ml容量瓶中，各加钒钼酸铵显色剂10ml，用水稀释至刻度，摇匀，常温下放置10min以上，以0ml溶液为参比，用10mm比色池，在420nm波长下，用分光光度计测定各溶液的吸光度。以磷含量为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线。
 

　　试样的测定：
 

　　准确移取试样分解液0.5ml—10ml(含磷量50—750mg)(实际中取0.5ml)于50ml容量瓶中，加入钒钼酸胺显色剂10ml，按5的方法显色和比色测定，测得试样分解液的吸光度，用标准曲线查得试样分解液的含磷量。一般先要将植物样品的消化，再蒸馏、吸收和滴定。
 

　　测定N的话一般用凯氏法测定，测P一般用钼蓝比色法在分光光度计(72型)读出消光值，对比标准曲线得出。